化妝品中甲醇(1)的標準檢驗方法及注解
UDC 668.53：543 .062
GB 7917.4－87
Standard methods of hygienic test for cosmetics Methanol
本標準適用于含乙醇的化妝品中甲醇含量的測定。
1 方法提要
試樣直接或經蒸餾后，以氣相色譜法進行測試和定量(2)。
2 樣品采集
見GB7917.1－87《化妝品衛生化學標準檢驗方法 汞》第2章。
3 試劑
3.1 甲醇（99.5％）：分析純。
3.2 無甲醇乙醇：取1.0μl注入色譜儀，應無雜峰出現。
3.3 GDX－102（60～80目）：氣相色譜試劑。(3)
3.4 甲醇標準溶液：取甲醇2.5ml，置于預先注入95ml水的100ml容量瓶中，然后加水至刻度，混勻備用。此溶液為2.5％甲醇溶液。
3.5 氯化鈉：分析純。
3.6 消泡劑：乳化硅油。如284PS，上海樹脂廠出品(4)。
4 儀器
4.1 氣相色譜儀：具氫火焰離子化檢測器(5)。
4.2 色譜柱：玻璃柱或不銹鋼柱，規格2m×Ø4mm，內填充GDX－102（60～80目）擔體(6)。
4.3 全玻璃磨口水蒸餾裝置：如圖。
4.4 微量進樣器：0.5μL或1μL。
5 分析步驟
5.1 啟動色譜儀，進行必要的調節，以達到儀器最佳工作條件。
色譜條件依具體情況選擇，參考條件為：
氣化溫度：190℃。
檢測器溫度：180℃。
柱溫：170℃。
氮氣流速：40ml/min。
氫氣流速：40ml/min。
空氣流速：500ml/min。
進樣量：1μl。
5.2
樣品預處理：液體或低粘度樣品，且甲醇含量較高時，可取10ml試樣，加無甲醇乙醇（3.2）至總體積為50ml，必要時可過濾，作為樣液備用。甲醇含量低的花露水等，也可不經稀釋直接測定。樣品粘度較大，無法直接測定，可以取10g試樣，置于蒸餾瓶中（如圖），加50ml水、2g氯化鈉（3.5）、必要時加1滴消泡劑（3.6），再加30ml無甲醇乙醇（3.2），在沸水浴中蒸餾，收集約40ml蒸餾液于50ml容量瓶中，冷至室溫后，加無甲醇乙醇（3.2）至刻度，作為樣液(7)。
UDC 668.53：543 .062
GB 7917.4－87
Standard methods of hygienic test for cosmetics Methanol
本標準適用于含乙醇的化妝品中甲醇含量的測定。
1 方法提要
試樣直接或經蒸餾后，以氣相色譜法進行測試和定量(2)。
2 樣品采集
見GB7917.1－87《化妝品衛生化學標準檢驗方法 汞》第2章。
3 試劑
3.1 甲醇（99.5％）：分析純。
3.2 無甲醇乙醇：取1.0μl注入色譜儀，應無雜峰出現。
3.3 GDX－102（60～80目）：氣相色譜試劑。(3)
3.4 甲醇標準溶液：取甲醇2.5ml，置于預先注入95ml水的100ml容量瓶中，然后加水至刻度，混勻備用。此溶液為2.5％甲醇溶液。
3.5 氯化鈉：分析純。
3.6 消泡劑：乳化硅油。如284PS，上海樹脂廠出品(4)。
4 儀器
4.1 氣相色譜儀：具氫火焰離子化檢測器(5)。
4.2 色譜柱：玻璃柱或不銹鋼柱，規格2m×Ø4mm，內填充GDX－102（60～80目）擔體(6)。
4.3 全玻璃磨口水蒸餾裝置：如圖。
4.4 微量進樣器：0.5μL或1μL。
5 分析步驟
5.1 啟動色譜儀，進行必要的調節，以達到儀器最佳工作條件。
色譜條件依具體情況選擇，參考條件為：
氣化溫度：190℃。
檢測器溫度：180℃。
柱溫：170℃。
氮氣流速：40ml/min。
氫氣流速：40ml/min。
空氣流速：500ml/min。
進樣量：1μl。
5.2
樣品預處理：液體或低粘度樣品，且甲醇含量較高時，可取10ml試樣，加無甲醇乙醇（3.2）至總體積為50ml，必要時可過濾，作為樣液備用。甲醇含量低的花露水等，也可不經稀釋直接測定。樣品粘度較大，無法直接測定，可以取10g試樣，置于蒸餾瓶中（如圖），加50ml水、2g氯化鈉（3.5）、必要時加1滴消泡劑（3.6），再加30ml無甲醇乙醇（3.2），在沸水浴中蒸餾，收集約40ml蒸餾液于50ml容量瓶中，冷至室溫后，加無甲醇乙醇（3.2）至刻度，作為樣液(7)。
5.3 測定
取50ml容量瓶四只，分別注入1.00、2.00、3.00、4.00ml甲醇標準溶液（3.4），然后分別加入無甲醇乙醇30ml，并分別加水至刻，此標準序列含甲醇為：0.05％、0.10％、0.15％、0.20％。
依次從各容量瓶取1μL標準注入氣相色譜儀，記下各次色譜面積，并繪制峰面積－甲醇濃度（V/V）曲線。
取5.2制備的樣液1μL,注入氣相色譜儀,記錄色譜峰面積,并從標準曲線查出對應的甲醇濃度(8)。
6 分析結果的計算
按下式計算甲醇濃度：
甲醇（％，V/V）＝P/K
式中：P───從標準曲線上查得樣液甲醇濃度，％；
K───樣品稀釋系數，如按本方法稀釋系數為10/50樣品經蒸餾處理時，也視稀釋系數為10/50。
附加說明：
本標準由中國預防醫學科學院環境衛生監測所歸口。
本標準由“化妝品衛生化學標準檢驗方法”起草小組負責起草。
本標準主要起草人沈文、鄭星泉、陳辰。
本標準由中國預防醫學科學院環境衛生監測所負責解釋。
注解：
（1）甲醇（又名木醇或木酒精）主要經呼吸道和胃腸道吸收，皮膚也可部分吸收。甲醇吸收至體內后，可迅速分布在機體各組織內，其中以腦髓液、血、膽汁和尿中含量最高
，眼房水和玻璃體中的含量也較高，骨髓和脂肪中最低。甲醇有時顯的蓄積作用，未被氧化的甲醇經呼吸道和腎臟排出體外，部分經胃腸道緩慢排出。甲醇在體內主要被醇去氫酶（debynogenase）氧化，其氧化速度是乙醇的1/7，最后代謝產生為甲醛和甲酸。近年研究表明，甲醇在體內抑制某些氧化醇系統，抑制糖的需氧分解，造成乳酸和其它有機酸積累，從而引起酸中毒。
甲醇主要作用于中樞神經系統，具有明顯遙麻醉作用，可引起腦水腫，對視神經及視網膜有特殊選擇作用，引起視神經萎縮，導致雙目失明。
甲醇的皮膚吸收采用猴子等進行研究，推測人吸收30ml甲醇有危險。急性毒性：
LD50（口服） 人：1400mg/kg
LD50（吸入） 人：4000ml/L
因為甲醇毒性較強，故化妝品衛生標準（GB7916－87）規定甲醇為禁用物質。化妝品中含有的甲醇雜質含量不得大于0.2%（V/V）。
（2）檢驗化妝品中甲醇的方法有氣相色譜和分光光度法。前者準確、快速、靈敏度高，是首選方法。
取50ml容量瓶四只，分別注入1.00、2.00、3.00、4.00ml甲醇標準溶液（3.4），然后分別加入無甲醇乙醇30ml，并分別加水至刻，此標準序列含甲醇為：0.05％、0.10％、0.15％、0.20％。
依次從各容量瓶取1μL標準注入氣相色譜儀，記下各次色譜面積，并繪制峰面積－甲醇濃度（V/V）曲線。
取5.2制備的樣液1μL,注入氣相色譜儀,記錄色譜峰面積,并從標準曲線查出對應的甲醇濃度(8)。
6 分析結果的計算
按下式計算甲醇濃度：
甲醇（％，V/V）＝P/K
式中：P───從標準曲線上查得樣液甲醇濃度，％；
K───樣品稀釋系數，如按本方法稀釋系數為10/50樣品經蒸餾處理時，也視稀釋系數為10/50。
附加說明：
本標準由中國預防醫學科學院環境衛生監測所歸口。
本標準由“化妝品衛生化學標準檢驗方法”起草小組負責起草。
本標準主要起草人沈文、鄭星泉、陳辰。
本標準由中國預防醫學科學院環境衛生監測所負責解釋。
注解：
（1）甲醇（又名木醇或木酒精）主要經呼吸道和胃腸道吸收，皮膚也可部分吸收。甲醇吸收至體內后，可迅速分布在機體各組織內，其中以腦髓液、血、膽汁和尿中含量最高
，眼房水和玻璃體中的含量也較高，骨髓和脂肪中最低。甲醇有時顯的蓄積作用，未被氧化的甲醇經呼吸道和腎臟排出體外，部分經胃腸道緩慢排出。甲醇在體內主要被醇去氫酶（debynogenase）氧化，其氧化速度是乙醇的1/7，最后代謝產生為甲醛和甲酸。近年研究表明，甲醇在體內抑制某些氧化醇系統，抑制糖的需氧分解，造成乳酸和其它有機酸積累，從而引起酸中毒。
甲醇主要作用于中樞神經系統，具有明顯遙麻醉作用，可引起腦水腫，對視神經及視網膜有特殊選擇作用，引起視神經萎縮，導致雙目失明。
甲醇的皮膚吸收采用猴子等進行研究，推測人吸收30ml甲醇有危險。急性毒性：
LD50（口服） 人：1400mg/kg
LD50（吸入） 人：4000ml/L
因為甲醇毒性較強，故化妝品衛生標準（GB7916－87）規定甲醇為禁用物質。化妝品中含有的甲醇雜質含量不得大于0.2%（V/V）。
（2）檢驗化妝品中甲醇的方法有氣相色譜和分光光度法。前者準確、快速、靈敏度高，是首選方法。
（3）GDX-高分子多孔微球是 人工合成的新型固定相，還可以作為擔體涂漬固定液。它由苯乙烯（STY）和二乙烯苯（DVB）或乙基乙烯苯（EST）與二烯苯聚合而成。聚合物若為非極性（STY）與極性基團的化合物聚合，則形成極性聚合物。其優點是：
（a）具有較大的比表面卻無吸附活性中心。因而極性組分也能獲得正態峰。
（b）無流失現象，柱壽命長。
（c）對強極性化合物（醇、酮等）有較好的分離能力，并且有較強疏水性能，特別適用于分析混合物中微量水分。
（d）具有耐腐蝕性，可用于有腐蝕性的樣品分析；但不能分析二氧化氮，因與其反應，使固定相變質。
（e）熱穩定性好。最高使用溫度200～300℃。
（f）具有吸附、分配及分子篩三種作用，因而分離能力好。
（g）柱過負荷后，恢復快，不適用于制備色譜。
（4）消泡劑種類很多，此處所用系硅高分子化合物，乳化硅油284PS是甲基乙氧基硅烷（30～33％）與硅脂、聚乙烯醇加水至100的混合物。適合于含水樣品的消泡。凈化的248PS，其色譜圖在甲醇保留時間范圍內沒有雜峰。
（5）氫火焰離子化檢測器（FID），具有靈敏度高、死體積小、應答時間快、定量線性范圍寬、結構簡單、操作穩定、對溫度不靈敏、不需要置于控制溫度的恒溫箱中等特點。由于它靈敏度高，對載氣的純度要求也較高，對永久性氣體、水、甲酸、甲醛、二硫化碳等無應答。在使用（FID）檢測器時應注意：
（a）載氣、氫氣和空氣必須很好凈化。
（b）為了使離子化訊號不受載氣或氫氣流速的影響，應從實驗中找出適當的流速，一般流速比為：載氣+氫氣=1+1或1+2，本方法氮氣流速+氫氣流速=40ml/min+40ml/min。一般空氣流速與氧氣流速是10+1， 樣可使信號不隨流速而改變。本方法空氣流速是500ml/min。
（c）要經常保持離子頭清潔。
（d）要注意盡可能采用低蒸氣壓的固定液，防止固定液的流失引起基底電流和噪音的增大。
（e）樣品取量不能太多，特別是其中水分不能太多，否則會使溫度下降，影響靈敏度，有時甚至使火焰熄滅。
（f）屏蔽絕緣要好。
（g）要保持離子化室在適當溫度，保持空氣流速相當大，使燃燒生成的水有致冷凝并且及時排出。
（6）因為高分子多孔微球在空氣中加熱易變質，所以只能在裝柱后通載氣（N2、H2等）進行動態老化至基線平直。另外高分子多孔微球易產生靜電而影響裝柱，裝柱器具需用經丙酮或乙醇潤濕的紗布擦拭。裝柱方法同氣-液填充柱。
（7）從 國內產品分析來看，絕大部分樣品無需蒸餾，可以直接進樣。至于是否稀釋則需從含量來考慮。樣品結果應在標準曲線覆蓋范圍之內。10g樣品一般加20ml水，粘度太大的樣品可加50ml。但含乙醇低于50%的樣品，可以少加一點（如20ml）。此處加氯化鈉是為電解質破乳，并且使水相中含無機鹽，以利用甲醇蒸出。
（8）甲醇標準溶液0.05％、0.1％、0.15％、O.2％在103型GDX柱可以得到相應的mV數為0.85、1.50、2.34、2.98，保留時間約為40～100s。線性關系良好，此法回收率在95％以上，相對標準偏差在5％以下。
（a）具有較大的比表面卻無吸附活性中心。因而極性組分也能獲得正態峰。
（b）無流失現象，柱壽命長。
（c）對強極性化合物（醇、酮等）有較好的分離能力，并且有較強疏水性能，特別適用于分析混合物中微量水分。
（d）具有耐腐蝕性，可用于有腐蝕性的樣品分析；但不能分析二氧化氮，因與其反應，使固定相變質。
（e）熱穩定性好。最高使用溫度200～300℃。
（f）具有吸附、分配及分子篩三種作用，因而分離能力好。
（g）柱過負荷后，恢復快，不適用于制備色譜。
（4）消泡劑種類很多，此處所用系硅高分子化合物，乳化硅油284PS是甲基乙氧基硅烷（30～33％）與硅脂、聚乙烯醇加水至100的混合物。適合于含水樣品的消泡。凈化的248PS，其色譜圖在甲醇保留時間范圍內沒有雜峰。
（5）氫火焰離子化檢測器（FID），具有靈敏度高、死體積小、應答時間快、定量線性范圍寬、結構簡單、操作穩定、對溫度不靈敏、不需要置于控制溫度的恒溫箱中等特點。由于它靈敏度高，對載氣的純度要求也較高，對永久性氣體、水、甲酸、甲醛、二硫化碳等無應答。在使用（FID）檢測器時應注意：
（a）載氣、氫氣和空氣必須很好凈化。
（b）為了使離子化訊號不受載氣或氫氣流速的影響，應從實驗中找出適當的流速，一般流速比為：載氣+氫氣=1+1或1+2，本方法氮氣流速+氫氣流速=40ml/min+40ml/min。一般空氣流速與氧氣流速是10+1， 樣可使信號不隨流速而改變。本方法空氣流速是500ml/min。
（c）要經常保持離子頭清潔。
（d）要注意盡可能采用低蒸氣壓的固定液，防止固定液的流失引起基底電流和噪音的增大。
（e）樣品取量不能太多，特別是其中水分不能太多，否則會使溫度下降，影響靈敏度，有時甚至使火焰熄滅。
（f）屏蔽絕緣要好。
（g）要保持離子化室在適當溫度，保持空氣流速相當大，使燃燒生成的水有致冷凝并且及時排出。
（6）因為高分子多孔微球在空氣中加熱易變質，所以只能在裝柱后通載氣（N2、H2等）進行動態老化至基線平直。另外高分子多孔微球易產生靜電而影響裝柱，裝柱器具需用經丙酮或乙醇潤濕的紗布擦拭。裝柱方法同氣-液填充柱。
（7）從 國內產品分析來看，絕大部分樣品無需蒸餾，可以直接進樣。至于是否稀釋則需從含量來考慮。樣品結果應在標準曲線覆蓋范圍之內。10g樣品一般加20ml水，粘度太大的樣品可加50ml。但含乙醇低于50%的樣品，可以少加一點（如20ml）。此處加氯化鈉是為電解質破乳，并且使水相中含無機鹽，以利用甲醇蒸出。
（8）甲醇標準溶液0.05％、0.1％、0.15％、O.2％在103型GDX柱可以得到相應的mV數為0.85、1.50、2.34、2.98，保留時間約為40～100s。線性關系良好，此法回收率在95％以上，相對標準偏差在5％以下。