3月29日，國(guó)家質(zhì)檢總局和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)委聯(lián)合發(fā)布了有關(guān)蘇丹紅檢測(cè)方法國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)——《食品中蘇丹紅染料的檢測(cè)方法 高效液相色譜法》（GB/T 19681-2005）。該標(biāo)準(zhǔn)已于發(fā)布之日起實(shí)施。
這項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)適用于食品調(diào)味料和食品成品中蘇丹紅的檢測(cè)，克服了單純采用歐盟標(biāo)準(zhǔn)的不足，如定量不夠精確且不適于食品成品中蘇丹紅的檢測(cè)。相對(duì)于歐盟標(biāo)準(zhǔn)所要求的儀器、試劑等方面較高的成本而言，這項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)要求的儀器、試劑等方面的成本較低，我國(guó)絕大部分縣級(jí)技術(shù)機(jī)構(gòu)都可以根據(jù)這項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施檢測(cè)。
適用于大部分技術(shù)機(jī)構(gòu)
蘇丹紅在我國(guó)的食品中被發(fā)現(xiàn)時(shí)，我國(guó)檢測(cè)蘇丹紅的一個(gè)主要依據(jù)是歐盟標(biāo)準(zhǔn)。使用歐盟標(biāo)準(zhǔn)所要求的液質(zhì)聯(lián)用儀對(duì)食品中的蘇丹紅進(jìn)行檢測(cè)，必須對(duì)復(fù)雜的色譜結(jié)果進(jìn)行質(zhì)譜確證，一臺(tái)液質(zhì)聯(lián)用儀的價(jià)值高達(dá)300多萬(wàn)元，使用該儀器對(duì)消耗的試劑的純度及操作的人員的水平都有極高的要求。在我國(guó)的使用受到限制，我國(guó)目前絕大多數(shù)質(zhì)檢機(jī)構(gòu)都不具備液質(zhì)聯(lián)用儀，少數(shù)有儀器的機(jī)構(gòu)受人員、試劑等限制也不能很好利用。
按照我國(guó)發(fā)布并實(shí)施的蘇丹紅檢測(cè)方法國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，各地技術(shù)機(jī)構(gòu)需要配置或購(gòu)置的試劑與標(biāo)準(zhǔn)品有丙酮、正己烷、無(wú)水硫酸鈉、層析用氧化鋁（中性）、層析柱管、乙腈、乙醚、無(wú)水甲酸及蘇丹紅I～I(xiàn)V標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；需要配置的儀器設(shè)備包括高效液相色譜儀、分析天平、梯度泵、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、紫外檢測(cè)器、C18色譜柱（4.6x150cm）、勻槳器、離心機(jī)等。其中，高效液相色譜儀的市場(chǎng)價(jià)格約4萬(wàn)元，這種儀器在市級(jí)以上的技術(shù)機(jī)構(gòu)中已普遍配置，發(fā)達(dá)地區(qū)的縣級(jí)技術(shù)機(jī)構(gòu)一般也配置了高效液相色譜儀。除此以外，其他的儀器和試劑都是非常普遍的。需要注意的是，由于不同廠家和同一廠家不同批號(hào)的氧化鋁產(chǎn)品在活性性能上有很大的不同，很難將其統(tǒng)一精確地控制在一個(gè)活度上。標(biāo)準(zhǔn)制定過(guò)程中，技術(shù)人員將氧化鋁在105℃的條件下進(jìn)行兩個(gè)小時(shí)的活化處理，冷卻后加入適量的蒸餾水滅活，用20ml的丙酮配2%濃度正己烷洗脫，用肉眼觀察洗脫液的顏色和柱上殘留的顏色就可以評(píng)價(jià)是否可以使用。
蘇丹紅檢測(cè)方法國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)采用了簡(jiǎn)單的正相吸附固相萃取原理，一次性去除了樣品中紅辣椒和番茄中的干擾成分，使用目前國(guó)內(nèi)已普及應(yīng)用的高效液相色譜儀就可準(zhǔn)確完成4種蘇丹紅染料的檢測(cè)。制定這項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)時(shí)確定了科學(xué)的方法流程，這一流程也是實(shí)際檢測(cè)時(shí)應(yīng)遵循的檢測(cè)流程，即樣品制備－稱樣－分散－提取－離心－分出上清－蒸干－正己烷溶解－固相萃取－洗脫－定容－上機(jī)。據(jù)介紹，這種檢測(cè)易于操作，只要配備了相應(yīng)的儀器，關(guān)鍵是高效液相色譜儀，我國(guó)縣級(jí)以上技術(shù)結(jié)構(gòu)的檢測(cè)人員均可以依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)食品中的蘇丹紅含量進(jìn)行有效的檢測(cè)。
據(jù)大連市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所有關(guān)人士介紹，標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施后，有一些縣級(jí)技術(shù)機(jī)構(gòu)在檢測(cè)遇到問(wèn)題時(shí)向該所的技術(shù)人員咨詢，很多問(wèn)題在電話中幾句話就說(shuō)明白了。
適用于食品成品的檢測(cè)
歐盟標(biāo)準(zhǔn)方法即《辣椒粉及以辣椒為主要成分的產(chǎn)品中蘇丹紅和胭脂樹(shù)橙的含量分析》中使用的檢測(cè)儀器是大型液質(zhì)聯(lián)用儀。利用歐盟標(biāo)準(zhǔn)和液質(zhì)聯(lián)用儀對(duì)蘇丹紅進(jìn)行檢測(cè)，由于受提取和純化的限制，樣品中的蘇丹紅提取率很低，其中，對(duì)油性樣品中蘇丹紅的提取率約為60～70%。液質(zhì)聯(lián)用的方法對(duì)蘇丹紅的檢出限量較高，即必須在蘇丹紅的含量達(dá)到相對(duì)較高的水平時(shí)才可以檢出。這種方法對(duì)食品調(diào)味料中蘇丹紅的檢測(cè)效果很好，但不適合食品成品中蘇丹紅的檢測(cè)。
食品中的蘇丹紅一般都來(lái)自食品調(diào)味料。我國(guó)雖然有一些初具規(guī)模的食品調(diào)味料生產(chǎn)企業(yè)，但是，食品生產(chǎn)企業(yè)自己制備的和不規(guī)范的小企業(yè)甚至手工作坊生產(chǎn)的食品調(diào)味料還占有相當(dāng)大的比例。僅僅就食品調(diào)味料的生產(chǎn)進(jìn)行監(jiān)管是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，必須為食品中蘇丹紅的檢測(cè)提出檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)。適用于我國(guó)國(guó)情的檢測(cè)方法，不僅要包括食品調(diào)味料，還要包括食品成品。
已實(shí)施的蘇丹紅檢測(cè)方法國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)采用了簡(jiǎn)單的正相吸附固相萃取原理，可以一次性去除樣品中紅辣椒和番茄中的干擾成分；經(jīng)過(guò)嚴(yán)格篩選的提取溶劑，可以將目標(biāo)化合物從被分析的樣品中不丟失的完全提取出來(lái)；在欠缺質(zhì)譜定性檢測(cè)條件下，通過(guò)氧化鋁的強(qiáng)吸附作用，可將蘇丹紅從其他的基質(zhì)成分中純化、富集出來(lái)；高效液相色譜儀可以準(zhǔn)確完成4種蘇丹紅染料的檢測(cè)。這些特點(diǎn)表明，我國(guó)的蘇丹紅檢測(cè)方法國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)既適用于食品調(diào)味品，也適用于含蘇丹紅殘留量的食品成品。
高效液相色譜法的特點(diǎn)
據(jù)標(biāo)準(zhǔn)主要起草人、大連市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所高級(jí)檢驗(yàn)師潘煒介紹，高效液相色譜法具有如下特點(diǎn)：
適用范圍寬。由于本方法具有高提取率、高純化性能、高濃縮倍數(shù)，既可以用于檢測(cè)含蘇丹紅量相對(duì)較多的食品，也可以檢測(cè)含蘇丹紅量極少的食品。無(wú)論何種基質(zhì)的樣品，都可以應(yīng)用本標(biāo)準(zhǔn)對(duì)食品中的蘇丹紅進(jìn)行檢測(cè)，其中包括干基樣品（如辣椒面）、水基樣品（如番茄沙司）、油基樣品（如辣椒油）、膠基樣品（如醬類）、高蛋白質(zhì)樣品（如肉類）、動(dòng)物油脂（火鍋底料）等。
高提取率。保證檢測(cè)取得理想的結(jié)果，首先應(yīng)將目標(biāo)化合物從被檢測(cè)的樣品中完全提取出來(lái)，本標(biāo)準(zhǔn)選擇正己烷和丙酮為提取溶劑，水和丙酮為分散溶劑。對(duì)于純油基的樣品（像辣椒油）采用正己烷直接溶解，可保證提取率達(dá)95%。對(duì)于水基的食品（像番茄沙司），經(jīng)水和丙酮分散后采用正己烷提取，也可保證提取率在85%以上。
高純化性能。標(biāo)準(zhǔn)確定了中性氧化鋁粉作固相萃取，利用了氧化鋁對(duì)蘇丹紅的強(qiáng)吸附能力，并對(duì)油脂進(jìn)行飽和性吸附。在前處理時(shí)借助極性固相萃取填料一次性將干擾和污染物最大可能除掉，有助于將油性樣品中的大量油脂在隨后的清洗步驟中脫除。實(shí)驗(yàn)表明，氧化鋁可以有效脫除樣品中的干擾成分，使液相譜圖干凈清晰。
高濃縮倍數(shù)。由于本方法可獲得純凈的目標(biāo)化合物的洗脫液，因而可以任意比例進(jìn)行濃縮，配合了好的提取率和固相萃取的回收率。也就是說(shuō)，實(shí)際檢測(cè)中可以根據(jù)需要，任意地對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行濃縮，目標(biāo)化合物不因?yàn)楸粷饪s而影響其純凈度，可大大降低檢出限，即不會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響。
此外，本方法因除去了內(nèi)源干擾，可發(fā)揮出色譜/光譜圖可準(zhǔn)確地定性定量的優(yōu)勢(shì)。
本方法經(jīng)全國(guó)抽檢、省抽檢、工商抽檢、進(jìn)出口企業(yè)的原料控制等數(shù)十類數(shù)百個(gè)樣品的實(shí)測(cè)考察，結(jié)果表明，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確和判定正確，從未出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性的錯(cuò)誤，即未發(fā)生過(guò)誤判。
中國(guó)和歐盟蘇丹紅染料檢測(cè)方法的比較
歐盟的標(biāo)準(zhǔn)方法限于紅辣椒粉的使用，在歐盟的標(biāo)準(zhǔn)方法中已注明適用于辣椒粉和以辣椒為主要成分的產(chǎn)品，即主要指含辣椒的食品調(diào)味品。中國(guó)的方法至今還未見(jiàn)到不適應(yīng)的樣品。由于該方法的高提取率、高純化性能、高濃縮倍數(shù)，可同時(shí)適用于含蘇丹紅量多的樣品（如辣椒粉、辣椒油等）和含量極少的樣品（如食品成品漢堡包、香腸、肉餅等）。
歐盟的方法僅采用乙腈為提取液，對(duì)水性基質(zhì)略好（如辣椒粉），但對(duì)植物油和動(dòng)物油的基質(zhì)回收率約在65%以至更低，對(duì)蘇丹紅含量較大的樣品可以使用，但不能準(zhǔn)確定量，對(duì)含量小的樣品則完全不適用。中國(guó)方法對(duì)不同基質(zhì)的樣品采用不同的提取，從而保證從各種復(fù)雜基體中所提取的蘇丹紅有最大的回收率，根據(jù)樣品基質(zhì)選擇不同的提取溶劑，才能保證將各種樣品基質(zhì)中的多種蘇丹紅染料一并提取出來(lái)。
歐盟方法對(duì)提取液直接上機(jī)，經(jīng)有機(jī)溶劑提取后的樣品溶液中含有大量的脂肪和脂溶性雜質(zhì)，另外，對(duì)于辣椒和番茄制品會(huì)提取出大量的內(nèi)源性色素，這些雜質(zhì)一方面影響色譜的分離效果，使得色譜圖上干擾很多，沒(méi)有質(zhì)譜幾乎無(wú)法定性，還嚴(yán)重污染分離柱。中國(guó)方法在前處理時(shí)借助極性固相萃取填料將兩類干擾物質(zhì)最大可能除掉，保證定性的正確和分析柱壽命。方法簡(jiǎn)單，且選擇的中性氧化鋁對(duì)蘇丹紅類染料有很特異的吸附解析特點(diǎn)，自己填柱，可一步完成純化和濃縮。在保證好的氧化鋁活度時(shí)，蘇丹紅系列染料吸附解析率可達(dá)到100%，因此純化后的樣品在分析條件下無(wú)任何雜峰干擾，在柱純化過(guò)程中也能保證目標(biāo)化合物的回收。
歐盟方法受提取溶劑和不進(jìn)行純化的影響，無(wú)法進(jìn)行濃縮步驟，因而無(wú)法降低檢出限量。中國(guó)方法由于可獲得純凈的目標(biāo)化合物的洗脫液，因而可以任意比例進(jìn)行濃縮，配合了好的提取率和固相萃取的回收率，可大大降低檢出限。
歐盟方法采用液相色譜—光譜檢測(cè)進(jìn)行定量，質(zhì)譜進(jìn)行定性確證，其定性定量能力均不及本方法。我們發(fā)現(xiàn)對(duì)于辣椒制品，即使在最穩(wěn)定的色譜條件下，使用極性不同分離柱，也會(huì)出現(xiàn)辣椒內(nèi)源物質(zhì)和蘇丹紅的色譜峰的完全重疊，此時(shí)光譜圖無(wú)法定量，使用質(zhì)譜定量能力則遠(yuǎn)不及光譜。本法因除去了內(nèi)源干擾，可發(fā)揮出色譜/光譜圖可準(zhǔn)確的定性定量的優(yōu)勢(shì)。
歐盟方法的成本很高，分析成本來(lái)源于儀器本身成本、高純?cè)噭┏杀尽x器損耗成本和人員成本。中國(guó)方法在這幾項(xiàng)成本中占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)，在我國(guó)極易普及。
背景
蘇丹紅屬偶氮系列染料，是應(yīng)用廣泛的化工合成染色劑，主要應(yīng)用于蠟、油彩、汽油等工業(yè)領(lǐng)域，目前已確認(rèn)了有機(jī)偶氮染料的毒性，其大多數(shù)有致癌性，包括蘇丹紅Ⅰ、蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅲ和蘇丹紅Ⅳ。
我國(guó)有《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》。這項(xiàng)早在1996年就已發(fā)布的強(qiáng)制性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，允許使用的食品添加劑有800多種，但不包括“蘇丹紅”。也就是說(shuō)“蘇丹紅”是被國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)禁止使用在食品生產(chǎn)領(lǐng)域的。
我國(guó)和歐盟禁止蘇丹紅類染料用于食品生產(chǎn)。2004年6月14日，英國(guó)向消費(fèi)者和貿(mào)易機(jī)構(gòu)發(fā)出了警示，在超市食品中發(fā)現(xiàn)含有潛在致癌性的蘇丹紅I。2005年2月18日，英國(guó)食品標(biāo)準(zhǔn)管理局宣布收回受污染的359種食品。2005年2月23國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)出緊急通知，在全國(guó)展開(kāi)對(duì)含有蘇丹紅食品的抽查行動(dòng)，要求各地質(zhì)檢部門加強(qiáng)對(duì)含有蘇丹紅I食品的檢驗(yàn)和監(jiān)管，嚴(yán)防含有蘇丹紅I的食品流入市場(chǎng)。
知識(shí)
液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)法
自2003年4月，印度出口的紅辣椒制品中發(fā)現(xiàn)蘇丹紅I之日起，世界各國(guó)均對(duì)蘇丹紅的檢測(cè)方法進(jìn)行了研究。2004年1月，歐盟將辣椒制品的蘇丹紅的檢測(cè)范圍擴(kuò)大到蘇丹紅II、蘇丹紅III、蘇丹紅IV。由于涉及樣品大多是辣椒和番茄制品，樣品本身的復(fù)雜基質(zhì)直接干擾儀器檢測(cè)，且蘇丹紅具有非離子性脂溶物的特點(diǎn)，導(dǎo)致樣品提取、純化、富集非常困難，采用好的提取溶劑往往造成提取液中混入大量的干擾成分，若考慮低殘留量進(jìn)行富集往往首先濃縮的是樣品的內(nèi)源性物質(zhì)，結(jié)果使得干擾更為嚴(yán)重。由于這類染料的特點(diǎn)，先進(jìn)國(guó)家普遍采用的研究方法是液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)。歐盟標(biāo)準(zhǔn)方法《辣椒粉及以辣椒為主要成分的產(chǎn)品中蘇丹紅和胭脂樹(shù)橙的含量分析》中也使用大型液質(zhì)聯(lián)用儀。
質(zhì)譜檢測(cè)儀具有定性優(yōu)勢(shì)，是我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布前，檢測(cè)蘇丹紅中常用的辦法。已經(jīng)報(bào)道的方法有毛細(xì)管液相－電噴霧－飛行質(zhì)譜法，液相色譜－大氣壓化學(xué)電離－多極質(zhì)譜法和液相質(zhì)譜－電噴霧質(zhì)譜法，均屬于液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)法。該方法經(jīng)過(guò)液相分離、光譜定量、質(zhì)譜定性而最終實(shí)現(xiàn)對(duì)食品中蘇丹紅的檢測(cè)。液質(zhì)聯(lián)用儀的先進(jìn)性毋庸置疑。